【切片拍照扫描多重荧光多标染色免疫组化检测实验外包服务】
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免疫组织化学技术又称免疫细胞化学技术,是利用特异性抗原抗体结合性质定量检测化学物质的技术。应用免疫学基本原理--抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。
HE染色
苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中基本、使用广泛的技术方法。
HE(Haematoxylin and eosin)染色通过它可以做出病理诊断和发现寻求别的辅助方法,以达到准确,完整的病理诊断。
一、染色目的
病理学的切片,都通过一种以上的染料,通过各种不同的方法,将切片中各种不同的物质,在不同染液的作用下,将其显示出来,使之在光学显微镜下,能够的观看各种结构。例如,HE染色,好质量的切片可以清晰地显示出许多不同的结构,细胞核着蓝黑色,细胞浆着粉红色,软骨着蓝色等。清晰的结构为诊断提供可靠的依据,因此,染色技术也是病理技术中的重要组成部分,不断地总结,方能提高。如果染色不好,切片染色一团糟,红蓝不分,结构不清,层次不明,影响了镜下的观察,直接影响了临床诊断,染色结果的好坏直接关系到诊断的准确性。
HE染色实验外包.步骤:一般包含取材固定,脱水透明,浸蜡包埋,切片与贴片,脱蜡染色,脱水透明,封固等步骤。
多重多标荧光免疫组化检测(mIHC):
主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大(Tyramide signal amplification)是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。
多重荧光免疫组化检测技术可与高性能染料Alexa Fluor®、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。 TSA主要原理是利用酪胺Tyramide的过氧化物酶反应(酪胺盐在HRP催化H202下形成共价键结合位点),产生大量的酶促产物,该产物能与周围的蛋白残基(包括色氨酸、组氨酸和酪氨酸残基)结合,这样在抗原-抗体结合部位就有大量的生物素沉积,与随后加入的Streptavidin—HRP/荧光基团结合,经几次这样的循环放大,可以结合大量的酶分子or荧光基团,结果使其检测信号得到几何级放大。
多重多标荧光免疫组化检测优势:
1.高科研价值:分人、鼠两个系列,方便在小鼠肿瘤模型和人样品上进行平行实验,进行转化医学研究;
2.高兼容性:选用荧光染料标记适用于所有配备了紫外、FITC、CY3、CY5 等波段带荧光的显微镜、共聚焦显微镜和荧光切片扫描设备;
3.稳定性:加样过程无需避光操作,样品染色完4度保存半年,-20℃保存一年,荧光依然满足拍照需求;
4.方便性:所有抗体都经过筛选,特异性好,染色浓度均经过优化,减少研究者自己摸条件的过程。